如何排除制备色谱管路中的气泡，及使用注意事项

如何排除制备色谱管路中的气泡，及使用注意事项

气泡是影响色谱管路正常工作的主要原因之一，一般而言应采取如下措施降低气泡的影响：

1、正确安装：在装配色谱管路时，应尽可能使管路保持竖直，以减少液体流动特性的改变，减少气体在管路内形成气泡。

2、注水：装配完成后，应采用具有高质量实验室用水填充，防止环境中空气进入色谱管路，而形成气泡。

3、空气减压：通过减压泵或柱底排气阀等，把色谱管路中的分子空气进行抽出，以减少气泡的数量。

此外，使用色谱管路时，有以下几点注意事项：

1、管路的填充必须以液体试剂为主。

2、不能将温度过高的液体填充到管路中，以防止管壁膨胀、弯曲。

3、色谱管路在使用过程中需要注意不要摔、撞、和受挤压，以避免管路发生变形或崩毁。

4、严格按照书面操作规程进行操作，不能有任何差错。

5、在使用前，必须进行清洁、冲洗、消毒等处理，以防止实验过程中的污染。

如何判断气泡来源

制备色谱泵头外置的设计，我们可以很轻松地通过泵头上的管线判断气泡的来源。如果气泡在泵头内生成，则代表气泡由泵头及上游部件（流动相入口，阀门等）产生。如果气泡只生成于色谱柱的出口，则有可能是色谱柱未平衡完毕或者样品与流动相反应所生成。

如何排查气泡问题

1、拧紧仪器流动相管线的接头

流动相管线接头的松紧会直接影响流速准确性和管路气密性，如果产生气泡，我们只需要用手尝试顺时针拧紧接头即可。流动相管线在仪器的后部，是两根管线中较粗的一根。

2、将溶剂瓶放置于顶部托盘内

夏天，南方的实验室内温度经常会接近 30 度，导致二氯甲烷等低沸点溶剂在桶内产生气泡，溶剂抽取会非常困难。制备色谱标配了一个顶部的溶剂瓶托盘，可以放置四瓶 4L 的溶剂。放置于顶部的溶剂由于虹吸效应会自行流至阀门口并形成正压，这样即使在高室温环境下抽取低沸点溶剂时，也可以有效改善气泡过多的现象。

3、尝试清洗泵腔

泵腔内的异物也会导致泵头管线内生成气泡，泵腔可以通过一些步骤彻底清洗。

日常使用时的注意事项

通过上述的排查方法我们可以发现，泵腔的彻底清洗是其中最为繁琐的。制备色谱一般有一个简易的全机自动清洗程序，如果能保持清洗习惯，完全可以避免上述复杂的步骤。

选择工具中的 NP<>RP，即正相<>反相。这个功能一般是在正反相切换时，用异丙醇作为过渡溶剂清洗全机管路而使用的。

进入此功能后我们只需要准备 300mL 异丙醇和一个1号位有空试管的收集架即可。将所有流动相管线至于异丙醇中，安装旁通管线，把收集架放置在左侧，然后按下清洗管线，系统会自动运行清洗程序。

这个功能可以用异丙醇冲刷全机的管路、阀门、泵腔和流通池，并且可以确保泵腔内充满异丙醇。我们建议在需要长期停机前，如节假日前的最后一个工作日运行一次此程序，避免泵腔的密封圈和单向阀长期浸泡在侵蚀性的溶剂中。

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